Медицинский институт при Чувашском государственном университете им. Ульянова, Чебоксары

Люминесцентно-гистохимическое исследование кожи в области акупунктурных точек человека

Особый интерес у исследователей всегда вызывали необычные биофизические свойства точек акупунктуры (ТА). В литературе отражены результаты многочисленных электрофизиологических исследований, проведенных в разных странах, которые доказывают объективность существования ТА [1].

Накопленные фактические данные о гистоморфологических особенностях ТА позволяют объяснить большинство их биофизических свойств и высказать мнение, что они являются активными морфофункциональными элементами организма. Многими авторами высказывается предположение о том, что через ТА происходит взаимодействие внутренней среды организма с внешней [2, 3].

Учитывая особую важность ТА в лечебном процессе и необходимость объяснения необычных их биофизических свойств, проводилось тщательное гистологическое исследование ТА. Так, Е.М.Крохина с соавт. [4] при гистохимических исследованиях кожи обнаружили гистаминергические, холинергические, серотонинергические и адренергические мякотные и безмякотные нервные волокна в области ТА, находящиеся в непосредственном контакте с тучными клетками (ТК). Ими было обнаружено, что изменения электропроводности в области ТА более стабильны, чем изменения электропроводности самой кожи, которая в основном зависит от работы потовых желез и факторов окружающей среды.

Нашей целью было исследование нейромедиаторного состава кожи человека в области ТА с помощью комплекса люминесцентно-гистохимических методов.

Методы исследования.

Люминесцентно-гистохимическими методами была исследована структура кожи в ТА меридианов толстого кишечника (GI 11), печени (F 13), заднесрединного (VG 14) и вне их у 10 трупов — 7 мужчин и 3 женщины, среднего возраста, условно здоровые при жизни и умершие от травм. Время с момента наступления смерти до взятия материала было не более 12 ч. Срезы с целью выявления катехоламинов, серотонина и тканевого гистамина окрашивали методом Фалька с соав. (1969) и методом Кросса с соав. (1971). Для определения функционального состояния ТК применялся метод окраски полихромным толуидиновым синим по Унна. Параллельно срезы окрашивались гематоксилин-эозином и метилгрюн.

Кусочки кожи размером 1 см2 после определения локализации ТА с помощью прибора «Элитерис» брали в зонах ТА и рядом вне ТА. Срезы изучали под микроскопом при увеличении в 600 раз. В каждом препарате определяли количества ТК в 10 полях зрения, а затем вычисляли средний показатель их числа на одно поле зрения (1 п.з.).

Результаты и обсуждение.

При исследовании срезов, обработанных по методу Кросса, эпителий кожи люминесцирует зеленым цветом. Наибольшее содержание тканевого гистамина выявляется в вентральных ТА и составляет 6,92 у.е. (см. таблицу). Сосочковый слой дермы люминесцируют слабее сетчатого слоя. Выявляется небольшое число нервных и эластических волокон, фибробластов.

При исследовании срезов, обработанных по методу Фалька, эпителий кожи люминесцирует ярко-зеленым цветом. Наибольшее содержание катехоламинов и серотонина выявляется в вентральных ТА и соответственно составляет 6,02 и 7,86 у.е. Сосочковый слой дермы люминесцирует слабее сетчатого. Выявляется небольшое число нервных и эластических волокон, фибробластов. В адвентиции кровеносных сосудов проходят адренергические нервные волокна. Наши данные по вегетативной иннервации ТА совпадают с данными Е.М.Крохиной с соавт. [4].

На границе собственно кожи и подкожной клетчатки, а также в толще сетчатого слоя находятся округлые образования, окруженные слабо светящейся соединительнотканной оболочкой, в которых имеются скопления гранулярных люминесцирующих клеток (ГЛК). В свою очередь образования делятся соединительнотканными перегородками в среднем на 4—6 долек. В дольках выявляются плотно расположенные мелкие, ярко-желтой или оранжевой окраски гранулярные клетки. В некоторых из них гранулы имеют разный размер и различаются по цвету. Наибольшее число ГЛК в дольке (48—50) встречается в вентральных ТА (F 13), вне ТА их меньше в 1,3 раза. Количество гранул в ГЛК варьирует (от 3 до 42), некоторые гранулы лежат вне клеток. Вне ТА чаще встречаются гранулы, лежащие отдельно. Подобные клетки были выявлены в 1980 г. [3], но были оценены как секрет потовых желез. Однако при окрашивании параллельными методами на моноаминоксидазу и с докраской метилгрюн мы обнаружили в них оболочку и ядро. Такие клетки неоднократно описывались ранее в других органах [1].

Потовые железы выявляются с помощью обеих люминесцентных методик. Наиболее крупные из них наблюдаются в коже дистальных

(GI 11) и вентральных (F 13) ТА и рядом находящихся участков. Максимальное число вышеописанных долек в потовой железе достигает 50.

Гистологический срез, исследованный по методу Фалька, перекрашивали по методу Массона — Фонтаны. Эпидермис, сетчатый и сосочковый слои импрегнируются в светло-коричневый цвет. Хорошо определяются инкапсулированные нервные окончания, около которых находятся темно-коричневые фибробласты. Около сосудов располагаются дегранулированные ТК. Гранулы их импрегнируются неодинаково: от светло– до темно-коричневого.

На границе сетчатого слоя и гиподермы, а также в сетчатом слое, среди белой жировой ткани, между клетками концевых отделов и выводных протоков части потовых желез имеются скопления клеток многоотросчатой формы, имеющих гранулы разного размера и цвета (от светло– до темно-коричневого). Скопления аргентафинных клеток совпадают с некоторыми ГЛК, выявленными люминесцентно-гистохимическими методами исследования.

На основе ранее опубликованных работ можно предположить, что ГЛК — это макрофаги [4], однако импрегнация части этих клеток говорит о том, что некоторые ГЛК обладают нейромедиаторными функциями [5]. Все вместе взятое еще раз подтверждает, что часть ГЛК являются клетками, принадлежащими диффузной эндокринной системе. Возможно, что апудоциты вовлечены в систему внутренних ходов меридианов и через межклеточные контакты щелевого типа могут регулировать функционирование соседних клеток [6].

При окраске гематоксилин-эозином в эпителии кожи обнаруживаются тельца Мейснера, меланиновые клетки, кератиновые тельца, что совпадает с данными многих авторов [7—9]. Сосочковый слой в ТА уже, чем вне их. Обычно его толщина практически равна толщине эпителия, однако встречаются препараты, в которых этот слой широкий и равен 60 мкм.

При окраске по Унна в дорзальных ТА эпителий тоньше, чем вне ТА, сразу под эпителием верхняя треть сосочкового слоя окрашена g-метахроматично. Весь сосочковый слой заполнен ортохромными ТК, концентрирующимися под эпителием. В сетчатом слое кожи коллагеновые волокна расположены рыхло, в отличие от зон вне ТА, где волокна располагаются параллельно относительно друг друга.

К потовым железам, которые располагаются в дерме или между собственно дермой и гиподермой, подходит 2—3 кровеносных сосуда. Около них в большом числе определяются g-метахроматичные ТК. Между сосочковым и сетчатым слоем находятся прослойки соединительной ткани с лежащими в них лимфоцитами, плазмоцитами, ТК разной метахромазии.

Между дермой и гиподермой, а также под эпителием встречаются структурные комплексы, состоящие из вены, 1—2 лимфатических сосудов, артерий, множества клеточных элементов, ограниченные от окружающей ткани уплотненной соединительнотканной капсулой с волокнами, идущими под углом к основным волокнам.

Около сальных желез располагаются b-метахроматичные ТК веретеновидной формы.

В некоторых срезах под эпителием выявляется огромное чисто ТК (52 в 1 п.з.), расположенных вкруговую около сосудов. В гиподерме, в сетчатом слое g-метахроматичные ТК, тотально распавшиеся, образуют целые поля вблизи сосудов. Часть этих клеток плотно прилегает к выводным протокам потовых желез, образуя скопления (до 50), а часть находится в отдалении. Половина из них окрашена g-метахроматично, имеют тоненький ободок цитоплазмы и крупное ядро.

Вне дорзальных ТА, между потовыми железами и около сосудов, также присутствуют b-метахроматичные тотально распавшиеся ТК. Однако их общее число меньше, чем в ТА.

Сравнивая срезы кожи ТА, исследованные разными методами, можно резюмировать, что

в вентральных ТА, как и в дорзальных, на границе с гиподермой выявляется большое число потовых желез, концевые секреторные отделы и выводные протоки которых содержат гранулярные, тучные и жировые клетки.

В местах предполагаемых потовых желез встречаются и неокрашенные участки кожи в виде пустот, покрытых по периферии соединительнотканной капсулой.

Вне вентральных ТА эпителий неравномерно утолщен. В базальном и шиповатом слоях эпителия клетки накапливают меланин. Сосочковый слой шире, сосочки сглажены или не сохранены. Граница между сетчатым и сосочковым слоями выражена нечетко. Иногда сосочковый слой не сохранен, а сразу появляется сетчатый слой. Может наблюдаться смещение сосочкового и сетчатого слоев в некоторых участках кожи.

ТК под эпителием располагаются равномерно, в сосочковом слое они находятся в дегранулированном виде. Также встречаются потовые железы с нейромедиаторными (гранулярными) клетками и без них.

В дистальных ТА сетчатый и сосочковый слои разделены множественными пустотами. В сетчатом слое меньше грубых эластических, больше коллагеновых волокон. ТК (b– и g-метахроматичных) больше в 1,4 раза по сравнению с участком кожи вне ТА. Секреторные и концевые отделы потовых желез также имеют эпителиальные, миоэпителиальные и гранулосодержащие клетки.

Вне дистальных ТА концевые отделы потовых желез имеют в большом числе g-метахроматичные ТК.

Таким образом, во всех исследуемых нами участках кожи встречаются два вида потовых желез: с гранулярными клетками, содержащими нейромедиаторы, и без них.

Заключение.

Проведенные люминесцентно-гистохимические исследования позволяют утверждать, что нейромедиаторных клеток (тучных, пигментных, гранулярных) в коже человека находится в области ТА больше, чем вне их. Часть потовых желез содержит нейромедиаторные клетки, расположенные между основными эккриновыми клетками. Наибольшее число нейромедиаторных клеток наблюдается в вентральных ТА.

Литература

1. Табеева Д.М. Иглотерапия. М; 1998; с. 22—31.

2. Вержбицкая Н.И., Кромин А.А. Морфофункциональные параметры точек акупунктуры и связанных с ними внутренних органов в разных условиях эксперимента. В кн.: Теория и практика рефлексотерапии. Саратов: Изд-во Саратов ун-та; 1981;

3. с. 56—60.

4. Вогралик В.Г., Вогралик М.В. Пунктурная рефлексотерапия. Горький: Волго-Вятское кн. изд-во; 1988; 335 с.

5. Крохина Е.М., Чувильская Л.М., Новикова Е.Б. Некоторые проблемы вегетативной иннервации зон акупунктуры кожи человека. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии 1980; 3: 59—71.

6. Яглов В.В. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии 1989; 1: 14—15.

7. Чернилевский В.И., Гудошников В.И., Миркин А.С., Соколов П.П. Возможная взаимосвязь между системой ТА и каналов и механизмами эндокринной регуляции. Физиология человека 1992; 5: 171—173.

8. Афанасьев Ю.И., Горячкина В.Л. Кожа и ее производные. Учебное пособие. М; 1996; с. 51.

9. Олангин О.И. Гистохимия макрофагов тимуса при усиленном и подавленном ответе на модели 1, 2 и 3 триместров беременности. Чебоксары; 2000.

10. Яблонцев Н.Н. Феномен повышенной электропроводимости функционально активных точек кожи и ТК. В кн.: Диагностическая и терапевтическая аппаратура рефлексотерапии и биофизические методы диагностики. Калинин; 1983.