Исследование соскоба со слизистой носа и с конъюнктивы

Приложение II

А. Исследование отделяемого из носа

I. Забор материала. 1-й способ. Больного просят высморкаться в лист вощаной бумаги (15 см ґ 15 см). Тампоном переносят слизь на предметное стекло и распределяют ровным слоем (можно прижать предметное стекло к слизи). 2-й способ. Ватный тампон помещают в ноздрю на 2—3 мин. Слизь с тампона переносят на предметное стекло.

II. Окраска

А. Высушивают препарат на воздухе и окрашивают одним из приведенных ниже способов.

Б. Окраска по Ханселу

1. Препарат фиксируют метанолом.

2. На препарат наносят краситель Хансела (эозин, метиленовый синий, 95% метанол и 5% глицерин) и инкубируют 30 с.

3. К красителю добавляют 5 капель дистиллированной воды и инкубируют 30 с (можно смешать краситель с водой, аккуратно дуя на стекло до появления маслянистых пятен).

4. Краситель сливают, препарат промывают дистиллированной водой.

5. Препарат заливают метанолом для обесцвечивания до бледно-зеленого цвета и высушивают на воздухе.

В. Окраска по Райту

1. Высушенный на воздухе препарат покрывают слоем красителя Райта (эозин, растворенный в бикарбонате натрия, метанол и метиленовый синий) и инкубируют 2—3 мин.

2. На препарат наливают фосфатный буфер (pH 6,4) и, аккуратно дуя на стекло, смешивают его с красителем. Препарат инкубируют 2—3 мин.

3. Препарат промывают дистиллированной водой и высушивают на воздухе.

Оба способа окраски мазков применяются также при исследовании мокроты и отделяемого из глаз.

III. Микроскопия мазка. Оценку качества приготовленного препарата и выбор участка для микроскопического исследования проводят при 100-кратном увеличении. Затем на мазок наносят каплю иммерсионного масла и исследуют при 1000-кратном увеличении. Подсчитывают число эозинофилов (клетки с оранжевыми гранулами и синим ядром, разделенным на два сегмента) и гранулоцитов (цитоплазма нейтрофилов и базофилов окрашена в бледно-розовый цвет, сегментированное ядро — в синий) в 5 полях зрения. Результат выражают в виде отношения числа эозинофилов к общему числу гранулоцитов. Цитоплазма эпителиальных клеток окрашена в голубой цвет, несегментированное ядро — в синий.

IV. Оценка результатов исследования

А. Если эозинофилы составляют 10% и более от общего числа гранулоцитов, следует заподозрить аллергический ринит.

Б. Преобладание нейтрофилов указывает на инфекцию. Содержание эозинофилов в мазке при этом может быть умеренным.

В. Отсутствие или незначительное число эозинофилов и нейтрофилов в мазке наблюдается при вазомоторном рините.

Б. Исследование соскоба со слизистой носа и с конъюнктивы

А. Яловайский, Р. Цайгер

I. Забор материала. Больного просят высморкаться. У грудных детей отделяемое удаляют с помощью резиновой груши. Под контролем глаза делают соскоб с заднего отдела нижней носовой раковины. Для этого одноразовой пластиковой кюреткой дважды, слегка нажимая, проводят по слизистой. Во избежание загрязнения материала кюретку извлекают, не касаясь преддверия полости носа. Чтобы произвести соскоб с конъюнктивы, выворачивают нижнее веко (больной должен смотреть вверх) и, слегка надавливая, проводят кюреткой по конъюнктиве. Перед процедурой можно провести местную анестезию, например с помощью глазных капель с проксиметакаином. Полученный материал распределяют на небольшом участке предметного стекла и фиксируют 95% этанолом в течение 1 мин или сохраняют в нем до окрашивания.

II. Окраска мазка. Мазки обычно окрашивают по Райту—Гимзе. Окрашивание по Ханселу применяют для выявления эозинофилов, окрашивание по Райту — для выявления эозинофилов, тучных клеток и базофилов(см. в этом приложении в части А п. II.А и п. II.В). Ниже описана окраска по Райту—Гимзе.

А. Препарат извлекают из емкости с этанолом, избыток этанола удаляют с помощью фильтровальной бумаги, не допуская высыхания препарата на воздухе.

Б. Погружают препарат в краситель Райта—Гимзы на 10—15 с.

В. Избыток красителя удаляют с помощью фильтровальной бумаги, препарат погружают в буферный раствор на 15—30 с.

Г. Избыток буфера удаляют с помощью фильтровальной бумаги, препарат несколько раз погружают в промывочный раствор на 4—5 с.

Д. Избыток промывочного раствора удаляют с помощью фильтровальной бумаги, препарат высушивают на воздухе.

III. Микроскопия мазка. Оценку качества приготовленного препарата и выбор участка для микроскопии проводят при 100-кратном увеличении. Затем на мазок наносят каплю иммерсионного масла и исследуют при 1000-кратном увеличении. Результаты исследования выражают количественно в виде среднего числа клеток данного типа в 10 полях зрения при большом увеличении или качественно (см. п. IV). В норме в соскобах выявляются цилиндрические, мерцательные цилиндрические, бокаловидные и базальные клетки, которые окрашиваются в бледно-синий цвет, эозинофилы, базофилы и тучные клетки отсутствуют, число нейтрофилов и бактерий незначительно, содержание бокаловидных клеток не превышает 50% от общего числа эпителиальных клеток.

IV. Оценка результатов исследования соскоба со слизистой носа (среднее число клеток в 10 полях зрения при 1000-кратном увеличении).

V. Оценка результатов исследования соскоба с конъюнктивы. Количественная оценка результатов исследования не важна для диагноза.